Convidamos a todos para a Defesa da Tese de Doutorado do discente do nosso programa, Pedro Sanches Oquendo Júnior.

A defesa pública ocorrerá no dia 25/02/2026 às 09h:00, no formato híbrido, presencial na sala 2B213, Campus Umuarama e por videoconferência com acesso através do link: 

https://teams.microsoft.com/meet/26156012997274?p=KofyhcbTCZAdDG1U9G

Será apresentado o trabalho com o título: "Integridade cromatínica e morfometria das cabeças espermáticas e suas relações com a concepção em éguas".

Resumo: Esta tese é sobre alterações morfométricas da cabeça e da cromatina de
espermatozoides de garanhões e qual relação destas alterações com a prenhez de éguas após
inseminação artificial. Ela está dividida em três capítulos: 1- revisão bibliográfica sobre
morfometria de espermatozoides e sobre alterações na integridade da cromatina espermática,
com enfoque principal em equinos; 2- constituído por um artigo em inglês, já submetido à
“Animal Reproduction Science”, intitulado “Chromatin integrity and sperm head morphometry
evaluated in semen smears and their relationship with conception in artificial insemination in
mares”; e 3- constituído de um “short communications” a ser submetido à “Animal
Reproduction” em ainda em português, intitulado “Reinterpretação do método de Nicoletti
para avaliação de integridade da cromatina espermática equina: análise comparativa com
SCSA”. No capítulo 2 o estudo avaliou se as alterações na compactação da cromatina detectadas
por Azul de Toluidina, Reação de Feulgen e Laranja de Acridina, bem como variáveis
morfométricas computacionais da cabeça do espermatozoide, estão associadas à concepção em
éguas inseminadas. De modo geral, os métodos de coloração da cromatina avaliados não se
mostraram preditores satisfatórios de concepção nas condições estudadas. Em contrapartida, a
morfometria computacional da cabeça do espermatozoide, em especialmente a elipticidade,
demonstrou potencial como ferramenta complementar e objetiva para estimar a fertilidade de
garanhões. No capítulo 3 o estudo comparou o SCSA com o método de Nicoletti. O método de
Nicoletti, desenvolvido para identificar apoptose em timócitos, mensura a perda de DNA usando
Iodeto de Propídio. A análise tradicional de Nicoletti, onde as células alteradas formariam uma
população com menor intensidade de fluorescência, não se correlacionou com o SCSA. No
entanto, foi observado uma subpopulação de espermatozoides com maior intensidade de
fluorescência que apresentou correlação positiva significativa com o SCSA. Provavelmente,
devido à alta compactação da cromatina espermática, o dano na cromatina manifesta-se pelo
aumento da acessibilidade do corante e não pela perda de DNA, exigindo uma reinterpretação
do método para esta espécie.

Palavras-chave: Morfologia espermática, elipticidade, análise de imagem computacional, prenhez,
fragmentação de DNA, SCSA

Abstract:. This thesis is about morphometric alterations of the sperm head and chromatin of
stallions and the relationship of these alterations with the pregnancy of mares after artificial
insemination. It is divided into three chapters: 1- a literature review on sperm morphometry and
alterations in sperm chromatin integrity, focusing mainly on equines; 2- consisting of an article
in English, already submitted to “Animal Reproduction Science”, entitled “Chromatin integrity
and sperm head morphometry evaluated in semen smears and their relationship with
conception in artificial insemination in mares”; and 3- consisting of a “short communication” to
be submitted to “Animal Reproduction” in Portuguese, entitled “Reinterpretation of the Nicoletti
method for evaluating equine sperm chromatin integrity: a comparative analysis with SCSA”. In

Chapter 2, the study evaluated whether alterations in chromatin compaction detected by
Toluidine Blue, Feulgen Reaction, and Acridine Orange, as well as computational morphometric
variables of the sperm head, are associated with conception in inseminated mares. In general,
the chromatin staining methods evaluated did not prove to be satisfactory predictors of
conception under the studied conditions. In contrast, computational morphometry of the sperm
head, especially ellipticity, demonstrated potential as a complementary and objective tool for
estimating stallion fertility. In Chapter 3, the study compared SCSA with the Nicoletti method.
The Nicoletti method, developed to identify apoptosis in thymocytes, measures DNA loss using
Propidium Iodide. The traditional Nicoletti analysis, where altered cells would form a population
with lower fluorescence intensity, did not correlate with SCSA. However, a subpopulation of
spermatozoa with higher fluorescence intensity was observed, showing a significant positive
correlation with SCSA. Probably due to the high compaction of sperm chromatin, chromatin
damage manifests as increased dye accessibility rather than DNA loss, requiring a
reinterpretation of the method for this species.

Keywords: Sperm morphology, ellipticity, computational image analysis, pregnancy, DNA
fragmentation, SCSA