Convidamos a todos para a Defesa da Dissertação de Mestrado da discente do nosso programa, Ana Carolina Guimarães Fenelon.

A defesa pública ocorrerá no dia 10/02/2025 às 14h00, por videoconferência.

Será apresentado o trabalho com título: Expressão e Purificação de uma proteína de Leptospira spp. selecionada in sílico e sua aplicação no diagnóstico.

Resumo:
No Brasil, no período de 2019 a 2024, foram confirmados 15711 casos de leptospirose em humanos. A
leptospirose é uma doença de caráter zoonótico e cosmopolita, causada por uma bactéria do gênero
Leptospira. O objetivo do presente estudo foi realizar a expressão e purificação de uma proteína
recombinante da Leptospira interrogans sorovar Copenhageni cepa M20 que foi selecionada in sílico; e
utilizá-la como antígeno no teste de Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) indireto para a
detecção de anticorpos IgG contra Leptospira spp. em amostras de soro de cães positivos para
leptospirose. Foi realizada expressão e purificação da proteína recombinante, os soros de cães positivos
para leptospirose foram submetidos ao teste de Teste de Aglutinação Microscópica (MAT), a proteína
recombinante foi utilizada como antígeno para o teste de ELISA indireto para detecção de anticorpos
anti IgG de cão nas amostras negativas e positivas para leptospirose. O teste de ELISA apresentou
diferença estatística significativa nas leituras entre animais positivos e negativo, dos animais positivos
para leptospirose no teste de MAT três foram negativos no teste de ELISA. Também apresentou uma
sensibilidade de 76,9%, indicando que ele detecta corretamente 76,9% dos animais positivos no MAT. Da
mesma forma, a especificidade de 76,9% mostra que ele identifica corretamente 76,9% dos animais
negativos no MAT. Os resultados demonstraram a importância e a possibilidade da utilização dos
epítopos selecionados na área de diagnóstico para leptospirose e que há outros ensaios relacionados à
imunoinformática, tais como a criação de vacinas. São necessários mais estudos sobre a aplicação de
proteínas recombinantes de Leptospira spp. em outras técnicas, buscando assim melhorar a parte
diagnóstica e incentivar outras pesquisas relacionadas ao comportamento e dinâmica da imunidade nos
animais na presença desse micro-organismo.

Abstract:
In Brazil, from 2019 to 2024, 15,711 cases of leptospirosis in humans were confirmed. Leptospirosis is a
zoonotic and cosmopolitan disease caused by a bacterium of the genus Leptospira. The objective of the
present study was to perform the expression and purification of a recombinant protein from Leptospira
interrogans serovar Copenhageni strain M20 that was selected in silico; and to use it as an antigen in the
indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) test for the detection of IgG antibodies against
Leptospira spp. in serum samples from dogs positive for leptospirosis. Expression and purification of the
recombinant protein were performed, the sera from dogs positive for leptospirosis were subjected to the

Microscopic Agglutination Test (MAT) test, the recombinant protein was used as an antigen for the indirect
ELISA test for the detection of anti-dog IgG antibodies in negative and positive samples for leptospirosis.
The ELISA test showed a statistically significant difference in the readings between positive and negative
animals. Of the animals that tested positive for leptospirosis in the MAT test, three were negative in the
ELISA test. It also showed a sensitivity of 76.9%, indicating that it correctly detects 76.9% of the animals
that tested positive in the MAT. Likewise, the specificity of 76.9% shows that it correctly identifies 76.9%
of the animals that tested negative in the MAT. The results demonstrated the importance and possibility
of using the selected epitopes in the area of leptospirosis diagnosis and that there are other tests related
to immunoinformatics, such as the creation of vaccines. Further studies are needed on the application of
recombinant proteins of Leptospira spp. in other techniques, thus seeking to improve the diagnostic part
and encourage other research related to the behavior and dynamics of immunity in animals in the
presence of this microorganism.